使用病毒采样管时该注意那些事项?

灭活型和非灭活型病毒保存液都有什么特点?

灭活型和非灭活型病毒保存液都有什么特点?

一次性使用病毒采样管通常分为两种,一种是非灭活型的,能够保护病毒的蛋白和核酸,另一种是灭活型,通常含有灭活病毒的裂解盐,裂解蛋白而保护核酸。

非灭活型病毒采样管:

非灭活型病毒采样管保存的病毒完整性更好,检出率更高,除了核酸检测外还可以用于其他研究。灭活型病毒保存液则使用上更安全,操作环境要求也不用那么严格,各有各的优势。

一次性使用病毒采样管(非灭活型)特点:

①、低温非冻型保存,不破坏病毒的外壳,方便长途运输;

②、适用于各种拭子样品,包括口腔拭子、鼻腔拭子、咽拭子等;

③、可以用于H1N1流感病毒和其他任何可以用拭子采样的病毒;

④、保存液中的抗生素能有效防止细菌和真菌感染;

⑤、保存液中添加了牛血清白蛋白,它能够保护病毒样本,提高分离率。

灭活型病毒保存液:

灭活型病毒保存液里含有Tris、裂解盐、EDTA等主要目的是裂解核酸而释放出核酸,从而通过后续的实时荧光RT-PCR进行核酸检测,以判断样本是否含有病毒特征核酸,即是否感染病毒。

核酸是由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物,包括脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)两类,是生命的最基本物质之一。病毒结构单一,就只含有一种核酸和蛋白质,因此检测出特征核酸就检测出病毒。病毒属于寄生生物,采样后体外无法存活,如果不能及时检测,就需要放入病毒保存液中。为了保护病毒检测环境的安全性,就需要加入裂解盐来灭活病毒,释放出可以被检测的核酸即可。

一次性使用病毒采样管(灭活型)的特点:
①、操作使用简单,无需配液,体系内含有高效病毒裂解液,采样后即刻灭活病毒,有效防止二次感染风险,保障运输及检测人员安全;

②、病毒DNA/RNA可在常温保存与运输1周不降解,按大多数商业化试剂盒进行提取后,获得的DNA/RNA质量好,得率高,可完成各种基因检测及分析实验,如PCR/qPCR等,同时节省运输成本;

③、内含核酸RNA酶抑制剂,最大化程度保护病毒核酸稳定不被降解,大幅提高核酸提取效率。适用于新冠病毒、流感病毒、手足口病毒等常见病毒样本采集保存运输工作,可采集咽拭子鼻拭子或特定部位组织样本,储存的样本可用于后续的核酸提取或纯化等临床试验。

 

灭活病毒的保存液试剂具有什么优势?

灭活病毒的保存液试剂具有什么优势?

灭活病毒的保存液试剂通常指灭活型病毒保存液,与非灭活保存液不同,它不需要保留病毒的活性,可以在迅速杀灭病菌的同时又不会对后续的病毒核酸检测造成影响。

灭活型病毒保存液因为是用于高效灭活病毒的,在采样与检测处理环节都比非灭活型保存液安全性高,不会造成二次感染,所以操作要求和实验环境要求都稍微低一些。对于快速核酸检测的效率与核酸检测覆盖率来说更有优势。

这种类型的病毒保存液之所以能快速灭活病毒是因为液体中含有高浓度的裂解盐。常用的胍盐有盐酸胍、异硫氰酸胍等,这种成分在浓度较高的时候可以迅速将病毒的蛋白质外壳变性裂解,让保存液中的病毒核酸被释放出来,然后通过核酸检测就可以判断是否感染病毒。

也有一种不含胍盐的灭活型保存液,而是用其他的裂解盐,作用是与胍盐是类似的,都是裂解病毒蛋白。还有一些不含胍盐的保存液能在灭活病毒的同时既保护病毒RNA也保留蛋白活性,这种除了用于核酸检测也能用于lgM、lgG抗体检测、抗原检测。

病毒在被病毒保存液灭活后还能被检测出来是因为每一种细胞或生物具有特定的核酸序列,通过DNA的扩增和测序就可以确定是否是病毒特定的核酸序列。RNA病毒的核酸需要经过逆转录转换成DNA再进行测序。