灭活病毒保存液是如何裂解病毒的
有些地方核酸检测比较多,直接把这种灭活型病毒保存液称为核酸释放剂,它最根本的特点是快速灭活病毒,将病毒蛋白膜衣壳降解掉,同时将病毒核酸(新冠是RNA病毒)释放出来,这样可以进行逆转录后PCR扩增实验,达到利用核酸检测病毒的目的。
裂解病毒的方式有很多种:比如加热法和浓盐法
加热法是需要加热80到100摄氏度加热5~10分钟,操作很简单,只用一步即可得到用于核酸PCR扩增的模板,不需要任何离心、抽提等操作步骤,比常用的CheleX100提取方法和苯酚/氯仿方法快。这种方法虽然简单快速,但是提取的核酸含量较少。
而浓盐法是高浓度的盐可以破坏核酸与蛋白质之间的次级键,使核蛋白解联,使病毒核酸释放出来。通常使用盐酸胍、异硫氰酸胍或非胍盐裂解盐,可以直接裂解灭活病毒,不需要加热处理样本,简便快速。
灭活型病毒保存液中除了含有裂解的成分,通常还含有使蛋白变性破坏膜结构的去污剂、生物缓冲剂还有防止核酸酶降解核酸的抑制剂,以及维持核酸结构稳定的试剂等。裂解体系还可能加入蛋白酶,将蛋白质切成小片段,促进蛋白质与核酸的分离。
华晨阳科技为了满足不同的检测需求,不仅有灭活型的病毒保存液也有非灭活型的保存液, 在国内外深受好评。